Способ получения сложных эфиров антибиотиков из группы полиеновых макролидов или их @ -замещенных производных

Авторы патента:

A61K31/7048 - содержащие кислород в качестве гетероатома, например лейкоглюкозан, гесперидин, эритромицин, нистатин

Способ получения сложных эфиров антибиотиков из группы полиеновых макролидов или их К-заг 1е1ценных производных общей формулы , / R-C- OBi где R - остаток полиенового макролида такого, как пимарицин, нистатин, полифуигии, гшфо-терицин в, ауреофасцин, или ) его N-згцлещенное пр 1звод ное, причем заместителем является.N-ацетил, N-(NvN -диметиламино )-метилен, N-пентен-2-он-4-иЛ2 , N-

СОКИ СОВЕТИ4ИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

СПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЙ-

И AATEHTY

ГРСУДАРСТВЕННИЙ КОМИТЕТ СССР

f30 ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНЯТИЙ, :(21) 2945106/23-04 (22) 07.07.80

;(31) Р 217239 (32} 18.07.79 (33) -ПНР (46) 30.10.83. Бюл. В 40 (72) Лэонард Фальковски, Барбара Стз фаньска, Элжбета Трока, Ежи Голик и Эдвард Боровски (ПНР) (71) Политехника Гданьска (ПНР) (53) 547;454.07(088.8) (56) 1. Патент СИЛ 9 4035568, кл. 536-17, опублик. 1977 (прототип1. (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СЛОЖНЫХ

ЭФИРОВ АНТИБИОТИКОВ- ИЗ ГРУППЫ ОЛИЕНОВЫХ ИАКРОЛИДОВ ИЛИ.ИХ N-ЗАИЕЩЕННЫХ

ПРОИЗ ВОДНЫХ. (57) Способ получения сложных эфиров антнбиотиков из группы полиеновых макролидов или их N-замещенных производных общей формулы /

E вЂ” б вЂ” ОЯ1

t ! где R - остаток полиенового макролнда такого, как пимарицин, „„SU „„1052154 A

yy) С 07 С 11/00, A 61 К 31 70 нистатин, поли@унгин, амфо-: терицин В, ауреофацин, илн

его N-замещениое произэод ное, причем заместителем является N-ацетил, N-(N,È -диметиламино)-метилен, М-пентен-2 он-4-ил-2, N-(1-карбоалкокси)-пропен-1-ил-2;

R -. С,-С -алкнл, фенил, 1-нитрофенил, бензил, метоксибенэил, отличающийся тем, что, с целью упрощения процесса и расширения ассортимента целевого продукта, на соответствующий полиеновый макролид или на его N-замещенное производное действуют спиртом формулы

R --ОН, 1 где R„ имеет указанные значения, в среде органического растворителя

I такого, как М,N-диметилацетамид, N,N -днметилформамнд, пиридин или тетрагндрофуран в присутствии дициклогексилкарбодиимида или дициклогексилкарбодиимида с добавкой гидроксибензтриазола при 20-40 С.

1052154

Изобретение относится к усовершенствованному способу получения сложных эфиров антибиотиков из группы полие- . новых макролидов или их И-замещенных производных, которые логут найти свое применение в медицинской практике.

Известен способ получения сложных эфиров антибиотиков из., например метилового эфира нистатина, пимарицина, амфотерицина, кандицидина, группы полиеновых макролидов, заключающийся 10 во взаимодействии соответствующего ,полиенового макролида в тетрагидрофу ране с диазометаном в тетрагидрофуране при комнатной температуре (13.

Недостатком известного способа по 15 лучения сложных эфиров полиеновых макролидов является использование для реакции алкилирования диазоалканов, взрывоопасных и токсичных веществ. 20

Цель изобретения вЂ” упрощение процесса и расширение ассортимента целевого продукта.

Указанная цель достигается тем, что согласно способу получения сло>к-I 25 ных эфиров антибиотиков из группы полиеновых макролидов или .их М-замещенных производных общей формулы.

Р-с,, (х)

1 где К - остаток полиенового макролида такого, .как пимарицин, нистатин, полифунгин, амфотерицин В, ауреофацин, или . 35 его N-замещенное производное, причем заместителем .является N-ацетил, И-(N N

-диметиламино) -метилен, N-пентен-2-он-4-ил-2, N- (1- 40

-карбоалко кси ) -пропе н-1-ил-2, R „ - C -С -алкил, фенил, и-нитрофейил, бензил, .метоксибензил, 45 на соответствующий полиеновый макролид, или на его Н-замещенное производное действуют спиртом формулы

R 1-0Н, (1I ) где R имеет указанные значения, 50 в среде органического растворителя такого, как N,N -диметилацетамид, N,N --диметилфармамид, пиридин или тетрагидрофуран в присутствии дициклогексилкарбодиимида или дициклогексилкарбодиимида с добавкой гидроксибенэтриазола при 20-40 С.

Ряд соединений, полученных этим путем, являются новыми.

Структура полученных производных 60 доказана путем сравнения с исходным антибиотиком из группы полиеновых макролидов, а также на основе спектроскопического анализа в ультрафиолете, видимом свете и в инфракрасном 65 излучении и массовой спектрометрии выполненной техникой десорбции полем.

Абсорбционные спектры в области видимого света и ультрафиолета полученных эфиров и исходных антибиотиков незначительно отличаются только интенсивностью, а положение максимумов абсорб ции и осциллационная структура являются одинаковыми.

Это свидетельствует о неизменной структуре полиенового хромофора в по- лученных производных.

Доказательством присутствия эфирной связи в молекуле производной антибиотика является присутствие интенсивной абсорбционной полосы s инфракрасном спектре при =1730 см " (для алифатических и ароматических эфиров) при одновременном отсутствии полосы карбоксиланового иона, характерного для исходного антибиотика при g =1590 см

Пример 1. 1 г нистатина (Е " =800 при 304 нм) и 1 г .дицикло4 гексилкарбодиимида (ДЦГК) растворяют в 200 см 3 безводного метанола и QMe шивают при 40 С в течение 15 мин.

В течение этого времени практически весь антибиотик прореагирует. Ход реакции контролируют с помощью тонкослайной хроматографии состава этилацетат:уксусная кислота:вода (4:1:1).

Затем испаряют метанол при уменьшенном давлении до объема в несколько кубических сантиметров и осаждают этиловым эфиром. После очистки продукт центрифугируют, промывают поочередно этиловым спиртом и гексаном и сушат при уменьшенном давлении, Получают 0,9 г сырого метилового эфира нистатина с Е =650 при 304 нм.

После очистки методом колоночной хроматографии на Sephadex .t. "20 в составе хлороформ".метанол (5:1) получают 0,8 г метилового эфира нистатина . (ЕЯ = 720 при 304 нм), что составляет 80% от теоретического.

p p и м.е р 2. К 1 r нистатина (Е < + =800 при 304 нм) и 1 ДЦГК добавляют 20 мл свежедистиллированного бензилового спйрта, смешивают до растворения и оставляют на ночь.

Добавкой 300 мл смеси этиловый спиртsгексан (2:1) осаждают продукт, центрифугируют, промывают поочередно этиловым спиртом и гексаном и сушат при уменьшенном давлении.

Получают 0,75 r эфира сырого продукта с Е"„ „=670 при 304 нм, который очищают методом колоночной хроматографии на Sephadex .е. 20 в составе хлороформйлетанол (10: 1) . Получают

0,65 r бенэилового эфира нистатина

1 o/Î с Е = 760 при 304 нм, что состав-. ляет 60% от теоретического.

Пример 3. 0,4 r нистатина, 0,3 r ДЦГК и. 0,5 r t>-нитрофенола

1052154

3 растворяют в смеси 3 см N,N --дигле-; :температуре. Способ выделения аналотилацетамида и пиридина (1:1), и ос- „ гичен пргплеру 7. тавляют на. ночь при 40 гС. После осаж- . 11олучают 0,45 r бензилового эфира дения этиловым эфирогл и неоднократ- N-ацетилаглфотерицина В с Е".ф„»1200 ной промывки эФиром и гексаном полу- при 383 нм, что составляет 85% от

1 чают 0 35 г сырого продукта (Е" » = 5 теоретического.

I "I см

= 630 при 304 нм). его очищают мето- П р и гл е р . 9. 0,5 r ii-ацетилнисдом колоночной хроматографии на си- татина (Е"„ "„»900 при 304 нм) и 0,4 г ликагеле, преднарительно насыщенном 4.1Гк растворяют в 3 мл свежедистил- водой,.в составе хлороформгбутанолг лированного бензилоного спирта и осгвода (20г20г1) и получают 0,3 r 10 тавляют на ночь при комнатной темпе- . р-нитрофенилового эфира нистатина ратуре. Способ выделения аналогичен

1(с Е $ =680 при 304 нм) что состав- примеру 7. Получают 0,4 r бензиловогс

1 /е

;ляет 65% от теоретического. эфира И-ацетилнистатина (Е г»»780 ! П р и гл е р 4. 0,5 .r нистатина и или 304 нм), что составляет 75% от

0,5 r ЩГК растворяют в 3 см насы- 15 .теоретического.

1щенного раствора фенола в И,М -диме- П р и и е р 10. 1 r полйфунгина тилацетамида и оставляют на ночь при. (Е©, 650 при 304 нм) растворягот.s

40 С. Осаждают этиловым эфиром про -. 10 мп безводного глетанола, добавлягот дукт и очищают методом колоначной 1 г дициклогексилкарбодиимида и смехроматографии на силикагеле, предва«. 20 шинают 24 ч при комнатной температурительно насыщенном водой, в составе ре. ход реакции контролируют с помохлороформгметанолгвода (20г10:0,5). щью тонкослойной хроматографии в сосПолучают 0,3 r фенилоного эфира ssc тане этнлацетат г уксусная кислота г татина (E " =700 при 304 нгл), что .. вода (4г1г1). Затеи добавляют 5 мл составляет 55о от теоретического. 25 бутанола, испаряют метанол при Умен °

1см ень.

Пример 5. Ы-(1-карбоалкок- шегпш давления и осаидают этиловым си}-пропен-,1-ил-2-БРА производная. . эфиром осадок метллового эфира поли«

3. r NPA-производной ауреофацнна. фунгина. Осажденный продукт проьивас Е " + »700 при. 373 нм и 0,5 r ЩГК,ют около трех раз и сУшат при Уменьрастворяют в 20 сгл. смеси глетанола и щенном давлении. Получают 580 r ме гф 91 тетрагидрофурана (1г1) и оставляют тилоного эфира полифунгина с Е1 „=

30 г ь на ночь при .400C-.. Затем сгущают - »760 при 304 нм, что составляет окопри .Уменьшенногл давлении до несколь - ло 70% от теооетического. с

Ы ких кубически:., сантиглетров и осажда- О ° 25 мкг/MII ит. продукт этиловыгл спиртогл. Пример .11. 0,5 r NPA-произл г/о.

Получают 0,9 г глетилового эфира . З водной амфотерицина В с Е„, 1550 .

ЫРА-производной ауреофацина .(Е при 382 нм растворяют.в 5 мл безвод=500 .при 378 нм). : : ного этанола, добавляют 0,5 г ДЦГК .гсм

II р и гл е р 6. 0,5 r NPA-произ-, и смешивают при комнатной температуре водной кандицидина (Ж „ " »500 при 24 ч, Реакцию контролируют с помощью

383 нгл) и 0,4 г Д4ГК растворяют в 40 тонкослойной хроматографии в составе

10 сгл сглеси метанола и тетрагидро- этилацетат г уксусная кислота: вода

° Фурана (1г1) и оставляют на ночь при. (4г1г1). Затем добавляют 1 мп пиридитемпературе 40 С. Выделение анаггогич- на и через 4 ч осаждают этиловым эфийо примеру 5. Получают 0,45 r (Еф,» рогл из раствора осадок этилового

=400), что составляет 80% от теорие-- gg эфира NPA-производной амфотерицина В.

Осадок двукратно проьнвают.этиловюю

Пример 7. О;3 г N-ацетилпи.- эфиром и сушат при уменьшенном давгларицигга с E I > =110 при 304 нм и, лении. Получают 0,4 r этилового эфира

О 2 г Дик растворяют в 2 I4II свеже ЯРА-производной амфотерицина.В дистиллированного бензилового спирта 50 IC>©»0,0» мкг/мп, что составляет 8 от и оставляют на ночь при комнатной теоретического с Ег " „ »1260 при 382 им.

Осадок этилового эфира. NPA-производной аглфотерицина В растворяют в сосОсадбк, выделенный сглесью этиловый таве хлороформ г метанол : вода ф" г ""-" (211) . наносят на колон- 55 (100г10г1) и наносят sa soacssy Seyку, наполненную гелем Sephadex ЬН 20, |Iadex L!L 20. После колонки вьщеляют. и хр и х оматографируют в системе хлоро-- 250 r эфира с Е »»1400.

12. 0 5 г NPA-произФор о м : метанол (5г1). Получают 0.,2 г G p и м е р. 12. О, бензилового эфира и 11-ацетилггираглици- водной нистатина с татина с Е1 " +850 растворяна (ЕЯ;„»1000 при 304 нм), что сос-. ют и 100 мл этанола, добавляют 0,4 r тавляет бОВ от теоретического. е0 Д4ГК и оставляют при комнатной темпе

П р и гл е р 8. 0,5 г N-ацетилам- ратуре на 24 ч. Полученный продукт фотерицина В с Е".," 1200 .при 383:нм,этилового эфира NPA-производной ниси 0 4 г Д4ГК растворяют в 5 глл свеже- титина осаждают этиловым эфиром, двуи, г рас дистиллированного бензилового спирта кратно прогивают э и о ф р в т этиловым эфиром и и оставляют на ночь при комнатной 65 сушат при уменьшенном давлении.о По.1052154

О, 300

0i800

Метиловый эфир

Бензиловый эфир

Нистатин р-Нитрофениловый эфир

Фенилс вый эфир

Бензиловый эфир N-ацетилнистатина

Этиловый эфир N-(пентен-2-он-4-ило- 2)-нистатина 0,500

Метиловый эфир N-(пентен-2-он-4-ило-2)-ауреофацина

Ауреофацин

0,005

0,001

Кандицидин

Метиловый эфир

Иетиловый эфир N-(пентен-,2-он-4-ило-2)-кандицидина

0,008 лучают 0,5 г этилового эфира NPA-производной нистатина с Е =500, IC „=

0,5 мкг/мл.

П. р и м е р 13. 100 мг NPA-производной. амфотерицйна с Е" =1560 при

382 нм растворяют в 20 мл бутанола, добавляют 100 мг ДИК и оставляют на 24 ч при 36 С. После проверки с помощью тонкослойной хроматографии в составе этилацетат : уксусная кисло:та : вода (4,1:1) и прореагирования >0 из реакционной смеси осаждают этиловым эфиром осадок, который двукратно проьивают этиловым эФиром и сушат при уменьшенном давлении.

Получают 85 мг бутилового эфира NPA-производной амфотерицина с

Е"ф1000 при 304 нм, что составляет

ЗОЪ от .теоретического.

П р и м .е р 14. 0,4 r NPA-производной пирамицина с Е < =900 при

304 нм растворяют в 20 мл безводного метанола.и добавляют 100 мг ДЦГК.

После реакции- в течение 20 ч при комнатнои температуре ход этой реакции ,проверяют методом тонкослойной хрома- 5 тографии (практически прореагировала целая NPA-производная). Осаждают оса. док из метанола с помощью этилового эфира, двукратно промывают этиловым эфиром и сушат при уменьшенном давленйи. Получают 14 мг метилового эфира МРА-производной пирамицина с

Е4 =600, ?С ) =мкг/мл.

: П р у м е р 15. 50 мг каидицидина с Е " =600 растворяют в 1 мл пирифЩ4 ЧС дийа, добавляют 50 мг дициклогексил-: карбодиимида и 50 мг гексаметилбенЭ-> триазола. После смешивания в течение

1 ч при 40 С добавляют 3 мл метанола и оставляют при комнатной температу-, ре на 24 ч.. Продукт реакции осаждают этиловым эфиром, двукратно промывают этиловым эфиром и сушат при уменьшенном давлении, Получают 35 мг метилового эфира кандицидина с E 1cM=550Ô 1СГО=

=0,001 мкг/мл

Пример 16. К 50 мг полифунгина с Е „,=650 добавляют 1 мл ани« сового спйрта и 50 мг ДЦГК. Реакция продолжается 30 ч при 40 С. Ход ре-. акции контролируют методом тоикослой. ной хроматографии в составе хлороформ: метанол: вода (100:25: 3) . По окончании реакции продукт осаждают этиловым эфиром, два раза,lfpoMMBcLIQT этиловым эфиром и сушат при уменьшенном давлении. Получают 30 мг анисового эфира полифунгина с Е + „ 650, 1С р.=0,4 мкг/мл.. Выход 65% от теоретического.

Противогрибковая активность сложных эфиров антибиотиков изобретения. представлена в таблице.

Таким образом, изобретение нозволяет получать сложные эфиры антибиотиков из группы полиеновых макролидов и их И-замещенных производных без использования взрывоопасных и токсичных диизоалканов и позволяет расширить ассортимент целевого продукта.

1052154

Продолжениа таблицы

Йюфотерицин Э

Ймрамйцмй

4,5

Жмй4уагмм

0,25

Метиловый эфир

0,4. Л

I ., (:4Sàâ««å«Åå «Е «« ° «

««

««««