Способ получения митотических полиплоидов райграса пастбищного

 

Использование1 биотехнология растений , культивирование тканей и клеток, сельское хозяйство, луговодство. Сущность изобретения: получают митотические полиплоиды райграса пастбищного путем обработки растительного материала колхицином, при этом проростки для обработки колхицином получают путем культивирования зародышей на питательной среде при содержании сахарозы 100 г/л, и перед помещением в условия закрытого грунта колхицинированные проростки переносят на ту же среду и выращивают при содержании сахарозы 30 г/л в течение 2-х недель при 10°С и в течение последующих 6-ти недель при 24°С, 1 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕ

ВЕДОМСТВО СССР (ГOCIlATEHT СССР) р 1

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ПАТЕНТУ (21) 4878343/13 (22) 29,10.90 (46) 07.11.92. Бюл. М 41 (71) Литовский институт земледелия (72) И.И.Пашакинскене (73) Литовский институт земледелия (56) Катков В,А, Получение и использование индуцированных тетраплоидов для создания исходного материала в родах Lolium u

Festuca, — M. ВАСХНИЛ, 1980, с.3-5. (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ МИТОТИЧЕСКИХ ПОЛИПЛОИДОВ РАЙГРАСА ПАСТБИЩНОГО (57) Использование: биотехнология растеИзобретение относится к селекции и генетике растений и может быть использовано для создания полиплоидных форм у райграса пастбищного, Известен способ получения митотических полиплоидов у райграса пастбищного, предусматривающий получение проростков путем проращивания семян на фильтровальной бумаге, синхронизацию клеточных делений холодом, обработку 0.2 -ным водным раствором колхицина и выращивание обработанного материала в условиях закрытого грунта, Недостатком указанного способа является низкий выход полиплоидов, который составляет около 10,0 Д от общего числа обработанных проростков,Цель изобретения — увеличение выхода полиплоидов у райграса пастбищного.

Поставленная цель достигается тем, что в известном способе получения полиплоидов, включающем получение проростков семян, синхронизацию клеточных делений!

Ы 1774843 А3 (s1)s А 01 H 1/04, 4/00, 1/06, С 12 N 5/04 ний, культивирование тканей и клеток, сельское хозяйство, луговодство. Сущность изобретения: получают митотические полиплоиды райграса пастбищного путем обработки растительного материала колхицином, при этом проростки для обработки колхицином получают путем культивирования зародышей на питательной среде и ри содержании саха розы 100 г/л; и перед помещением в условия закрытого грунта колхицинированные проростки переносят на ту же среду и выращивают при содержании сахарозы 30 г/л в течение 2-х недель при

10 С и в течение последующих 6-ти недель при

24 С, 1 табл. холодом, обработку водным раствором кол-, хицина и помещение колхицинированных проростков в условия закрытого грунта для выращивания растений, проростки семян получают путем эксплантации и выращивания зародышей на модифицированной питательной среде Линсмайера-Скуга при содержании сахарозы 100 г/л, а перед помещением в условия закрытого грунта колхицинированные проростки переносят на ту же среду при содержании сахарозы 30 г/л и выращивают в течение 2-х недель при 10 С и в течение следующих 6-ти недель при

24 С.

Пример, Зародыши извлекают из стерилизованных семян и проращивают при 24 С в пробирках на питательной среде следующего состава: макро- и микроэлементы 2/3 нормы по Линсмайеру и Скугу, тиамин 0,2 мг/л; ИУК 0,4 мг/л; кинетин

0,24 мг/л, сахароза 100 г/л; агар-агар 7 г/л.

Проростки длиной 3-8 мм, на 2 сут помещают в холодильник при 1»-0,5ОС, после чего

1774843

Составитель И.Г1ашакинскене

Техред M,MîðãåHòàë Корректор Н,Ревская

Редактор Л.Волкова

Заказ 3938 Тир аж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва. Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", r. Ужгород, ул.Гагарина, 101 ставят на 1 ч при 27-28 С в условиях интенсивного освещения и сразу заливают 0,3О ным стерильным водным раствором колхицина на 4 ч. Раствор колхицина предварительно стерилизуют через мембранные фильтры Mllllpore () 0,45 м), Колхицинированные проростки тщательно промывают стерильной водой и высаживают на новую среду того нсе состава при содержании сахарозы 30 г/л. Обработанный растительный материал на 2-е недели помещают в камеру искусственного климата при 10+1 С, после чего в течение следующих 6-ти недель культивируют при 24+2 С на той же среде, в тех

>ке пробирках (освещенность 16 ч), Выжившие проростки высаживают в вегетационные сосуды с почвой и выращивают в условиях теплицы, Сравнительная оценка эффективности разных методических приемов в стерильной культуре на выход полиплоидов райграса пастбищного ВМ 1212 и 1218 (по каталогу

ЛитИЗ) представлена в таблице (колхицин

0,3%, экспозиция 4 ч). В среднем по каждому варианту обрабатывались 68 проростков, Плоидность определяли по числу хромосом в корневой меристеме, Как видно из таблицы, наибольший выход полиплоидов 65,8% получают, когда для обработки колхицином используют проростки, полученные путем проращивания эксплантированных зародышей на питательной среде при содержании сахарозы

100 г/л, а культивирование колхицинированных проростков после обработки в течение 2-х первых недель проводят при +10 С

5 (вариант 7).

Предлагаемый способ позволяет увеличить выход полиплоидов райграса пастбищного примерно в 6 раз по сравнению с аналогичным способом, взятым излитерату10 ры, что соответственно сокращает затраты для создания новых полиплоидных форм.

Формула изобретения

Способ получения митотических поли 15 плоидов райграса пастбищного, включающий получение проростков семян, синхронизацию клеточных делений холодом, обработку водным раствором колхицина и помещение колхицинированных

20 проростков в условия закрытого грунта, о тличающийся тем,что,с цельюувеличения выхода полиплоидных растений, проростки семян получают путем эксплантации и выращивания зародышей на модифициро25 ванной питательной среде ЛинсмайераСкуга при содержании сахарозы 100 г/л и перед помещением в условия закрытого грунта колхицинированные проростки переносят на ту же питательную среду при

30 содержании сахарозы 30 г/л и выращивают в течение 2-х недель при 10 С и в течение последующих 6-ти недель при 24 С.