Способ получения волокна хлопчатника

 

Использование: биотехнология, культивирование тканей и клеток, хлопководство Сущность изобретения: семяпочки хлопчатника эксплантируют на модифицированную твердую питательную среду Бисли-Тинга, в которую дополнительно вводят феруловую и гибберелловую кислоту в концентрации 0,1 мг/л каждой и культивирование осуществляют в течение 36 дней. 1 з п. ф-лы, 1 табл

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (st)s А 01 Н 4/00, С 12 К 5/04

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ о, О

jQl 00

1)

1 (21) 4854912/13 (22) 15.06.90 (46) 15.09.92. Бюл. ¹ 34 (71) Научно-производственное объединение

"Биолог" АН УЗССР и Институт экспериментальной биологии растений (72) Ф,Р. Нуритдинова и Н.А. Власова (56) Beasley С,А. Ting I.P. The effects of plants

growth substances on in vitro fiber

development from fertilized cotton ovules.

Amer. J, Bot„v, 60, и, 2, р. 130-139. 1973.

Изобретение относится к биологии, в частности, биотехнологии хлопчатника.

Ранее в экспериментах показано действие гиберрелловой, индолилуксусной кислоты и кинетина на рост волокна в культуре семяпочки хлопчатника. Использование этих фитогормонов позволило автору найти оптимальный способ выращивания семяпочяки в культуре. Из описания Бисли следует, что в состав питательной среды входят макро- и микросоли, витамины и сахара.

По данным Бисли, рост волокна на искусственной среде с добавками фитогормонов осуществляют до 14-дневного возраста.

Считается, что такой возраст волокна вполне достаточен для изучения действия ростовых веществ на рост волокна, Недостатком метода Бисли является то, что его (метод) невозможно использовать, когда необходимо получение волокна в возрасте более 14 дней, (Для изучения механизмов биосинтеза целлюлозы необходимо... Ж,, 1761058 А1 (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ВОЛОКНА

ХЛОПЧАТНИКА (57) Использование .биотехнология, культивирование тканей и клеток, хлопководство.

Сущность изобретения: семяпочки хлопчатника эксплантируют на модифицированную твердую питательную среду Бисли-Тинга, в которую дополнительно вводят феруловую и гибберелловую кислоту в концентрации

0,1 мг/л каждой и культивирование осуществляют в течение 36 дней. 1 з, и. ф-лы, 1 табл, накопить как можно больше общей массы волокна).

Целью изобретения является повышение выхода волокна и удлинение периода его роста. Указанный способ отличается тем, что в питательную среду дополнительно вводят феруловую и гибберелловую кислоты в концентрации по 0,1 мг/л и культивирование осуществляют на твердой питательной среде, которая готовится следующим образом:

КН2РО4 5,44 г

КМОз 101,11

CaCIz H2O 8,82

НЗВОЗ 6,183

MnSO4 16,90

ZnSO4 7Н20 8,627

К! 0,83

Ма2Мо04 2HzO 0,242

Миоинозит 0,18

Д-гл ю коза 18,016

MgSO4 НгО 9,86 йаедтА 2,23

1761058

FeSO< Н О 0,167

CuSO4 5Н20 0,025

CoClz 6НгО 0,024

Пиродоксин хлорид 0,0411

Тиамин хлорид 0,0411

Никотиновая кислота 0,0568

Фруктоза 3,6032

Агар 7

Вводится также фуруловая и гибберрелловая кислота в концентрации 0,1 мг/л.

Все навески брали на 1 л дистиллированной воды, рН среды — 5,4 — 5,5. Все дальнейшие операции проводили применительно к нашим условиям, так же, как и приготовление среды, Полученную среду разливали по колбочкам Эрленмейера на 50 мл и автоклавировали 15 мин при 0,8 — 1 атм. Перед автоклавированием в питательную смесь вносили регуляторы роста в различных концентрациях и сочетаниях, которые будут описаны ниже. В асептических условиях сажали на поверхность питательной среды семяпочки и ставили в биологический термостат при 32 С, Волокно выращивали до

14 дней, а затем пересаживали в другие колбочки с такой же питательной смесью, но с добавлением ДНК + РНК + АТФ. Такой способ обеспечивает рост и накопление общей массы волокна, в отличие от метода

Бисли, в течение 36 дней. Кроме того, введение в питательную смесь феруловой кислоты в смеси с гибберелловой обеспечивает накопление общей массы волокна более, чем в 4 раза по сравнению с контролем.

Данные приведены в таблице.

Общую массу волокна определяли толуидиновым методом. Для этого брали 10 семяпочек, на поверхности которых сформировалось волокно, помещали в коническую колбочку на 100 мл смеси на 1 семяпочку, Затем колбочку ставили на качалку и встряхивали в течение 2-х мин. После встряхивания семяпочки с волокном промывали в воронке с фильтром сначала той же питательной смесью, а затем водой, После промывания семяпочки переносили в колбочки с раствором толуидина синего в буфере с рН 4,5, состоящего из 10, 14 мл

0,01М лимонной кислоты + 9,86 мл 0,016 М

Ма2НРО4 2Н20. Раствор толуидина нали5

50 вали из расчета на каждую пробу 4 мл на каждую семяпочку с волокном. Окрашивание производили в течение 15 — 20 с, после чего отфильтровывали и промывали осадок дистиллированной водой, Затем помещали семяпочки с волокном в раствор Корнуа, налитого в колбы Эрленмейера из расчета 5 мл раствора на 1 семяпочку, т. е. на 10 семяпочек с волокном необходимо использовать

50 мл раствора Корнуа. Через 1 ч после помещения семяпочек в раствор Корнуа измеряли оптическую плотность окрашенного раствора на СФ-4 при длине волны 640 мм, Расчет общей массы волокна устанавливали по стандартной кривой, как указано в работе Бисли.

Данный способ накопления волокна предлагается впервые и имеет огромный социальный эффект, т. к. высвободит крупные резервы хлопка-сырца для текстильной промышленности, Так, в настоящее время для получения целлюлозы используется преимущественно высококачественный хлопок-сырец, который мог бы успешно использоваться для выработки хлопчатобумажных тканей.

Применение вышеуказанного способа открывает новую технологию получения и накопления общей массы волокна на семяпочках нижних ярусов хлопчатника, которые в полевых условиях практически всегда опадают, Испытания проводились в течение 4 лет в Институте экспериментальной биологии растений АН УЗССР, Формула изобретения

1, Способ получения волокна хлопчатника, включающий эксплантацию семяпочки на модифицированную питательную среду Бисли и последующее культивирование ткани, отличающийся тем, что, с целью повышения выхода волокна и удлинения периода его роста, в питательную среду дополнительно вводят феруловую и гибберелловую кислоту в концентрации по 0,1 мг/л каждой и культивирование осуществляют на твердой питательной среде, 2, Способ поп, 1, отл ича ю щийся тем, что агар дополнительно добавляют в питательную среду в качестве уплотнителя в количестве 7 г/л, 1761058

Накопление общей массы волокна хлопчатника сорта Ташкент-1 (возраст 36 дней) Составитель Ф, Нуритдинова

Редактор М. Самерханова Техред М.Моргентал Корректор П. Гереши

Заказ 3199 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Рэушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101